La Pinacoteca dell'Ambrosiana si trova all'interno del Palazzo dell'Ambrosiana in Piazza Pio XI, 2 nel pieno centro di Milano, fermata MM Duomo,
All'inizio del Seicento all'interno del palazzo, il cardinale Federico Borromeo volle fondare una grande biblioteca. Nel 1618, in seguito ad un ampliamento degli edifici, il cardinale decise di donare all'Ambrosiana anche la sua vasta collezione di dipinti e disegni. La collezione, formata principalmente da opere dei maestri del Cinquecento, costituì il primo nucleo di quella che sarebbe diventata una delle pinacoteche più importanti di tutto il mondo. Nel 1625 venne anche aperta la prima accademia di Milano.
